金钱白花蛇

图片[1]-金钱白花蛇-酷瓶网

  本品为眼镜蛇科动物银环蛇Bungarus multicinctus Blyth 的幼蛇干燥体。夏、秋二季捕捉,剖开腹部,除去内脏,擦净血迹,用乙醇浸泡处理后,盘成圆形,用竹签固定,干燥。

  【性状】本品呈圆盘状,盘径3~6cm,蛇体直径0.2~0.4cm。头盘在中间,尾细,常纳口内,口腔内上颌骨前端有毒沟牙1对,鼻间鳞2片,无颊鳞,上下唇鳞通常各为7片。背部黑色或灰黑色,有白色环纹45~58个,黑白相间,白环纹在背部宽1~2行鳞片,向腹面渐增宽,黑环纹宽3~5行鳞片,背正中明显突起一条脊棱,脊鳞扩大呈六角形,背鳞细密,通身15行,尾下鳞单行。气微腥,味微咸。

  【鉴别】聚合酶链式反应法。

  模板DNA提取 取本品0.5g,置乳钵中,加液氮适量,充分研磨使成粉末,取50mg,置2.0ml离心管中,加入提取缓冲液200μl(含1%聚乙烯吡咯烷酮-40和1%曲拉通X-100的0.5mol/L氢氧化钠溶液),充分混匀;加入0.1mol/L Tris-盐酸溶液(pH8.0)800μl,混匀,离心(转速为每分钟12000转)5分钟;将上清液500μl转移至另一离心管中,加入0.1mol/LTris-盐酸溶液(pH8.0)500μl,混匀,离心(转速为每分钟12000转)5分钟;将上清液50μl转移至另一离心管中,加入无菌双蒸水450μl,混匀,作为供试品溶液,置-20℃保存备用。另取金钱白花蛇对照药材0.5g,同法制成对照药材模板DNA溶液。

  PCR反应 鉴别引物:5,GAAATTTCGGCTCTATGC-TTATAACCTGTCTTT3,和5,GGAATCTTATCGATAT-CTGAATTAGTA3,。PCR反应体系:在200μl离心管中进行,反应总体积为25μl,反应体系包括10×PCR缓冲液2.5μl,dNTP(10mmol/L)1μl,鉴别引物(10μmol/L)各0.2μl,TaqDNA聚合酶(5U/μl)0.2μl,模板DNA1μl,25%聚乙烯吡咯烷酮-40溶液1μl,10mg/ml牛血清蛋白0.5μl,无菌双蒸水18.4μl。将离心管置PCR仪,PCR反应参数:95℃预变性5分钟,循环反应30次(95℃30秒,60℃45秒),延伸(72℃)5分钟。

  电泳检测 照琼脂糖凝胶电泳法(通则0541),胶浓度为1.5%,每100ml胶中加入10000×核酸凝胶染色剂GelRed 5μl;供试品与对照药材PCR反应溶液的上样最分别为5μl,以DL2000(DNA条带从小到大分别为100bp,250bp,500bp,750bp,1000bp和2000bp)作为DNA分子量标记,进行凝胶电泳检测。电泳结束后,取凝胶片在凝胶成像仪上或紫外透射仪上检视。供试品凝胶电泳图谱中,在与对照药材凝胶电泳图谱相应的位置上,在500~750bp之间应有单一DNA条带,空白对照无条带。

  【浸出物】照醇溶性浸出物测定法(通则2201)项下的热浸法测定,用稀乙醇作溶剂,不得少于15.0%。

  【性味与归经】甘、咸,温;有毒。归肝经。

  【功能与主治】祛风,通络,止痉。用于风湿顽痹,麻木拘挛,中风口眼喝斜,半身不遂,抽搐痉挛,破伤风,麻风,疥癣。

  【用法与用量】2~5g。研粉吞服1~1.5g。

  【贮藏】置干燥处,防霉,防蛀。

在线查询结果来源于2020年版中国药典,仅供参考。

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